《五味子酸性多糖對小鼠抗疲勞作用的實驗研究》論文發表期刊：《北華大學學報(自然科學版)》；發表周期：2020年06期

《五味子酸性多糖對小鼠抗疲勞作用的實驗研究》論文作者信息：牛佳牧( 1966—) ，女，副研究員，主要從事中藥藥理學研究

　　摘要：目的 探討五味子酸性多糖(Schisandra chinensis acidic polysaccharide，SCPA)對小鼠抗疲勞的作用機制.

　　方法 將ICR小鼠隨機分為4組，即空白對照組(CON)、低劑量SCPA組、中劑量SCPA組、高劑量SCPA組.通過負重游泳實驗及前肢握力實驗觀察SCPA對小鼠運動耐力的影響;化學比色法檢測小鼠血清中尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)和乳酸(lactic acid，LA)、骨骼肌組織中丙二醛(malondialdehyde，MDA)和8羥基脫氧鳥苷(8-hydroxy-2'deoxyguanosine，8-0HdG)的水平結果 與CON組比較，SCPA組的運動耐力均顯示出不同程度的增強(P<0.05或P<0.01);BUN、LA、MDA及8-0HdG水平均顯著降低(P<0.05或P<0.01).結論SCPA對小鼠具有抗疲勞作用，該作用可能與其降低骨骼肌氧化損傷有關.

　　關鍵詞：五味子;酸性多糖;抗疲勞

　　Abstract: Objective To observe the anti-fatigue effect of Schisandra chinensis acidic polysaccharide (SCP-A)on mice. Method ICR mice were randomly divided into four groups, namely blank control group (CON) , lowdose SCP-A group, medium-dose SCP-A group, highose SCP-A group. Observe the effects of SCPA on the exercise endurance of mice through weight-bearing swimming experiments and forelimb grip strength experimentsTo detect blood urea nitrogen (BUN), lactic acid (LA) and skeletal muscle tissue in mice serum, the levels of malondialdehyde (MDA) and 8-hydroxy-2' -deoxvguanosine (8-OHdG) by using chemical colorimetry.

　　Results Compared with the CON group, the exercise endurance of the SCP-A group showed different degrees of enhancement (P<0.05 or P<0.01); BUN, LA, MDA and 8-OHdG levels were significantly reduced (P<0.05 or P<0.01) . Conclusion SCP-A has an anti-fatigue effect on mice, which may be related to its reduction of skeletal muscle oxidative damage.

　　Key words: Schisandra chinensis; acid polysaccharide ; anti-fatigue

　　隨著社會生活節奏的加快，疲勞已逐漸成為影響人們生活質量的主要健康問題最新的研究[表明：未來全球亞健康的人口比例將達到75%，其中，慢性疲勞綜合征(Chronic Fatigue Syndrome，CFS)是其主要的表現形式.當機體長時間進行超負荷的體力勞動而并未得到及時緩解時，會產生一系列的生理變化，大量的代謝廢物在體內聚集，進而造成機體運動耐力的暫時下降，最終產生一定的疲勞感覺21.疲勞嚴重時還會傷及機體其他的組織和器官，進而產生各種疾病[4，因此，開發一種具有抗疲勞作用的保健食品意義重大.

　　五味子(Schisandra chinensis(Turcz.)Baill)為長白山道地藥材，具有豐富的多糖及木脂素等活性成分.近年的研究74表明：五味子多糖具有抗氧化、抗感染、護肝等功效，安全性較好，因此，受到越來越多的學者關注·本研究中的北五味子酸性多糖(Schisandra chinensis acidic polysaccharide，SCP-A)是從北五味子總多糖中分離提取得到的酸性多糖成分，目前，關于SCPA對小鼠抗疲勞作用尚未見報道，因此，本研究通過給予小鼠低、中、高3種不同劑量的SCPA觀察其抗疲勞作用，為研發具有抗疲勞相關功能的藥物或保健食品提供理論依據

　　1材料與方法

　　1.1 實驗動物與試劑

　　健康雄性ICR小鼠(合格編號：SCXK(吉)20190008，長春億斯實驗動物技術有限公司)40只，體質量(20±2)g SCP-A(北華大學五味子開發及產業化工程研究中心);尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)、乳酸(lactic acid，LA)、丙二醛(malondialdehyde，MDA).8羥基脫氧鳥苷(8hydroxy-2'deoxyguano-sine，8-OHdG)檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所)

　　1.2 實驗方法

　　1.2.1 動物分組及給藥

　　將雄性ICR小鼠隨機分成4組：空白對照組、低劑量組(5 mg/kg)、中劑量組(10 mg/kg)、高劑量組(20 m g/kg)，每組10只，實驗前進行小鼠適應性實驗.

　　1.2.2 小鼠負重游泳實驗

　　末次給藥30 min后進行小鼠負重游泳實驗·將小鼠置于溫度(25±5)℃、水面高度20cm的塑料容器中，并在小鼠尾部負荷相當于體質量10%的鉛塊進行游泳訓練，以小鼠沉入水面10s不能浮出水面的時間作為力竭游泳時間t01.2.3 小鼠前肢握力實驗

　　根據小鼠善于攀爬、喜愛用爪抓取物品的習性，設計小鼠前肢握力實驗".在末次給藥30 min后，應用握力測試儀進行測試，并記錄小鼠的最大握力.

　　1.2.4 小鼠體內疲勞指標BUN，LA水平的測定

　　末次給藥60min后，將小鼠麻醉后進行眼眶取血，于3500 r/min、4℃的條件下離心15 min制備血清，并取骨骼肌組織，用生理鹽水漂洗后凍存于-80℃中備用.按照試劑盒所提供的檢測方法檢測小鼠血清中BUN、LA的水平

　　1.2.5 小鼠體內氧化指標MDA，8-0HdG水平的測定

　　取上述實驗所制備的小鼠骨骼肌組織，檢測骨骼肌組織中氧化指標MDA.8-0HdG的水平.

　　1.3統計學分析

　　應用SPSS 19.0對數據進行處理與統計學分析，小鼠負重游泳時間、前肢握力數值、BUN，LA及骨骼中MDA，8-OHdG水平的實驗數據用均數土標準差(xts)表示，組間兩樣本均數比較采用1檢驗，以P<0.05為差異具有統計學意義.

　　2結果與分析

　　2.1 負重游泳實驗和前肢握力實驗觀察SCPA對小鼠運動耐力的影響負重游泳實驗結果顯示：與空白對照組比較，5、10.20 mg/kg酸性多糖組小鼠力竭游泳時間均顯著延長(P<0.05或P<0.01)，且20 mg/kg與5mg/kg酸性多糖組比較小鼠游泳時間顯著延長(P<0.01);小鼠前肢握力實驗結果顯示：與空白組比較，5 mg/kg劑量組無顯著性差異(P>0.05)，10 mg/kg及20mg/kg劑量酸性多糖組小鼠前肢握力數值顯著增加(P<0.01)，其中20mg/kg與5 mg/kg酸性多糖組比較小鼠前肢握力數值顯著增加(P<0.05).結果見表1以上結果提示：SCP-A能夠增強小鼠運動耐力，且該作用可能具有劑量依賴性.

　　2.2 SCPA對小鼠血清中BUN、LA含量的影響

　　各組小鼠血清中BUN含量檢測結果顯示：與空白組比較，10 mg/kg及20 mg/kg酸性多糖組小鼠血清中BUN水平顯著降低(P<0.05或P<0.01)，且 20 mg/kg酸性多糖小鼠血清BUN較5 mg/kg組顯著降低(P<0.01);LA檢測結果顯示：與空白組比較，各劑量酸性多糖組小鼠血清中LA水平均顯著降低(P<0.05或P<0.01);且20 mg/kg酸性多糖小鼠血清LA較5 mg/kg組顯著降低(P<0.05).見表2.以上結果提示：SCPA能夠降低運動小鼠血清BUN和LA含量，具有一定的抗疲勞作用，且該作用可能具有劑量依賴性.

　　2.3 SCPA對小鼠骨骼肌中MDA.80HdG含量的影響

　　小鼠骨骼肌中氧化相關指標MDA.8-0HdG含量檢測結果顯示：與空白組比較，5 mg/kg劑量組小鼠MDA水平無顯著差異：10，20 mg/kg酸性多糖組小鼠骨肌中MDA、8-0HdG水平均顯降低(P<0.05或P<0.01)，且20mg/kg酸性多糖組較5mg/kg組顯著增加(P<0.05或P<0.01)，見表3以上結果提示：SCPA在運動小鼠骨骼肌組織中表現出顯著的抗氧化作用，且該作用可能具有劑量效應關系.

　　3討論

　　近年來，越來越多的中藥因具有緩解疲勞的作用而應用于抗疲勞領域.在臨床上運用中醫理論，合理配伍中藥能夠有效消除人體負荷運動后產生的疲勞，從而減輕其對人體產生的不利影響[12].本研究所選用的五味子酸性多糖是北五味子的主要活性成分之一，與木脂素類成分相比具有含量高、毒性低等優點，因此，其研究價值較高、運動耐力實驗及生化指標檢測是評價體力疲勞的兩種主要方法[13，其中，運動耐力的提高可直觀反映出機體抗疲勞能力的增強[1443，本研究采用了負重游泳實驗及前肢握力實驗兩種經典行為學實驗方法，觀察受試動物的肌肉力量變化，提示機體的疲勞狀態.負重游泳實驗是評價藥物抗疲勞作用最常用、最客觀的指標[1]，負重游泳時間越長，則表明藥物的抗疲勞效果越好，本研究結果顯示：經不同劑量的SCPA處理后各組小鼠負重游泳時間明顯增加;前肢握力實驗中，10.20 mg/kg酸性多糖組小鼠的前肢握力數值同樣明顯增加，表明了SCPA能夠提高小鼠的運動耐力，具有一定的抗疲勞作用.

　　為進一步明確SCPA的抗疲勞作用，本研究對小鼠血清中BUN、LA等評估機體疲勞程度最經典指標進行觀察.BUN是人體蛋白質分解代謝的產物，運動時機體內蛋白質和氨基酸分解代謝會加強，尿素生成增多，使BUN水平升高18 同時，長時間、大強度的運動還會導致機體內糖原的大量消耗及LA等代謝產物的堆積，最終導致肌肉疲勞[1921.本研究結果顯示：與CON組比較，10.20 mg/kg給藥組小鼠血清中BUN和LA的水平均明顯降低，進一步證實了SCPA具有較好的抗疲勞作用.

　　由于劇烈運動會加速自由基的產生，因此，也會造成氧化應激損傷的發生[224，本研究對小鼠骨骼肌中氧化相關指標進行了檢測，8-0HdG作為DNA氧化損傷的重要標志物，能夠衡量機體細胞內的氧化應激水平，其數值越高顯示機體損傷程度越嚴重[2 MDA作為脂質過氧化作用的終產物，同樣是反應自由基損傷的重要指標，其含量可間接反映細胞受自由基損害和過氧化的程度28-29 本實驗結果顯示：SCPA可以降低疲勞小鼠骨骼肌中MDA.8-0HdG水平，提示SCPA在疲勞小鼠中表現出顯著的抗氧化作用.

　　本研究依據前期實驗結果，選用低(5 mg/kg)、中(10 mg/kg)、高(20 mg/kg)3種劑量SCPA對抗疲勞作用進行觀察.研究結果顯示：高劑量(20 mg/kg)及中劑量(10mg/kg)組對運動耐力及疲勞、氧化等測定指標均具有顯著影響，而低劑量(5 mg/kg)對BUN、LA、MDA等指標的影響無統計學意義(P>0.05).提示SCPA對小鼠的抗疲勞作用可能與劑量呈現一定的關系，其具體的劑量效應關系將在后續的研究中進行觀察.綜上，SCP-A具有顯著的抗疲勞作用，其機制可能為通過提高機體抗氧化能力而發揮抗疲勞作用

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