摘 要：對2019年杭州地區水稻惡苗病暴發流行的原因進行了分析‍‌‍‍‌‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‍‍‌‍‌‍‌‍‌‍‍‌‍‍‍‍‍‍‍‍‍‌‍‍‌‍‍‌‍‌‍‌‍。 結果表明，稻種帶菌率高和對氰烯菌酯產生抗藥性是導致其大發生的主要原因‍‌‍‍‌‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‍‍‌‍‌‍‌‍‌‍‍‌‍‍‍‍‍‍‍‍‍‌‍‍‌‍‍‌‍‌‍‌‍。 進一步田間試驗表明，4.23%甲霜·種菌唑微乳劑400倍液和600倍液、25%咪鮮胺乳油2 000倍液、5%咪鮮胺乳油2 000倍液加25%氰烯菌酯懸浮劑2 000倍混配液浸種48 h對惡苗病的防效較好，顯著優于25%氰烯菌酯懸浮劑750倍液和2 000倍液，適合在老(重)病區和對氰烯菌酯抗性較高的地區輪換使用來控制惡苗病的發生為害‍‌‍‍‌‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‌‍‍‍‌‍‍‍‍‌‍‌‍‌‍‌‍‍‌‍‍‍‍‍‍‍‍‍‌‍‍‌‍‍‌‍‌‍‌‍。

　　關鍵詞：水稻; 惡苗病; 氰烯菌酯; 抗藥性; 防效

　　水稻惡苗病是危害水稻地上部分，主要由種子傳播的一種常見的真菌性病害，引起該病的病原菌為藤倉鐮刀菌[1-3]。 近年來，隨著浙江省水稻集中育秧的推廣，水稻惡苗病的發生日趨加重，嚴重威脅早稻的安全生產[4]。 當前防治水稻惡苗病的主要措施是采用化學藥劑對種子進行消毒處理，25%氰烯菌酯懸浮劑作為防治水稻惡苗病的適宜藥劑在浙江稻區大量使用，長期單一使用化學殺菌劑極易產生抗藥性[5-6]。

　　已有報道在浙江紹興地區分離到對氰烯菌酯高抗的惡苗病菌，田間試驗發現單獨使用氰烯菌酯浸種處理對水稻惡苗病的防效較差[7-8]。 2019年杭州市錢塘新區河莊街道早稻用25%氰烯菌酯懸浮劑對種子進行浸種消毒處理，水稻秧苗惡苗病仍大量發生，發病率嚴重的達到100%，造成大量的經濟損失。 為此我們開展了一系列試驗，一方面測定了種子帶菌率和惡苗病菌對氰烯菌酯的抗藥性，另一方面從生產實踐出發篩選了有效的種子浸種處理藥劑，通過研究力求科學防控水稻惡苗病的發生，保障糧食生產安全。

　　1 材料與方法

　　1.1 試驗材料

　　供試水稻品種：中早39號(浙江勿忘農公司); 供試藥劑：96%氰烯菌酯原藥(江蘇輝豐農化股份有限公司)、25%氰烯菌酯懸浮劑(江蘇省農藥研究所股份有限公司)、25%咪鮮胺乳油(江蘇輝豐生物農業股份有限公司)、4.23%甲霜·種菌唑微乳劑(愛利思達生物化學品有限公司)。

　　1.2 種子帶菌率測定

　　將稻種用無菌水清洗后，先用70%酒精浸泡1 min，再用3%(有效氯)次氯酸鈉溶液浸泡3 min，最后用無菌水清洗3遍，將種子在超凈臺中晾干后接種到加有100 μg/mL鏈霉素和100 μg/mL卡那霉素的馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養基平板上，每張平板均勻接種7個稻種，25℃黑暗培養3 d，觀察稻種表面及周圍的菌落情況。

　　1.3 惡苗病菌對氰烯菌酯的抗藥性測定

　　1.3.1 惡苗病菌分離

　　選取錢塘新區水稻育秧基地表現明顯惡苗病癥狀的水稻秧苗，從莖基部剪取約2~3 cm的莖段，用自來水沖洗干凈，先用70%酒精浸泡消毒1 min，再用3%(有效氯)次氯酸鈉溶液浸泡消毒3 min，無菌水沖洗3次，超凈臺中晾干，將莖段切成約5 mm的小塊，接種在含100 μg/mL鏈霉素和100 μg/mL卡那霉素的PDA培養基平板上，25℃黑暗培養5 d后，根據菌落顏色、形態判斷為鐮刀菌的菌株轉接到新的PDA培養基平板上，25℃黑暗培養，備用。

　　1.3.2 抗藥性測定

　　采用區分劑量法測定惡苗病菌對氰烯菌酯的抗藥性。 將氰烯菌酯原藥用丙酮配制成100 000 μg/mL的母液，然后配制成含氰烯菌酯質量濃度為0 μg/mL、0.25 μg/mL、1 μg/mL、50 μg/mL和200 μg /mL 的PDA 平板。 將分離菌株用打孔器切成直徑5 mm的菌餅，將菌餅接種至含氰烯菌酯的PDA平板上，每個平板接種7個菌餅，每個菌株每濃度處理重復3次。 25 ℃培養4 d后觀察菌落生長情況，具體設置見圖1。 不能在含0.25 μg/mL氰烯菌酯的培養基上生長的為敏感菌株; 能在0.25~1 μg/mL氰烯菌酯的培養基上生長的為低水平抗藥性菌株; 能在1~50 μg/mL氰烯菌酯的培養基上生長的為中等水平抗藥性菌株; 能在200 μg/mL氰烯菌酯的培養基上生長的為高水平抗藥性菌株[5]。

　　1.4 藥劑篩選試驗

　　試驗在杭州市錢塘新區河莊鎮進行，試驗作物為早稻，品種為中早39。 試驗設7個處理：處理1，清水浸種(CK); 處理2，4.23%甲霜·種菌唑微乳劑400倍液浸種; 處理3，4. 23%甲霜·種菌唑微乳劑600倍液浸種; 處理4，25%氰烯菌酯懸浮劑2000倍液浸種; 處理5，25%氰烯菌酯懸浮劑750倍液浸種; 處理6，25%咪鮮胺乳油2 000倍液浸種; 處理7，25%咪鮮胺乳油2 000倍液+25%氰烯菌酯懸浮劑2 000 倍混液浸種。

　　2019年4月8日浸種，每個處理用水量 2 000 mL，用種量1 500 g，各處理按設計濃度配制好藥液并充分攪拌后倒入干種子，撈去秕粒，浸種48 h后催芽，催芽1 d后播種，每個處理播9個秧盤，每個秧盤用種量166 g; 播后4 d擺盤灌水。 分別于播種后11 d、18 d調查水稻秧苗惡苗病發病情況，記錄發病株數，并計算各處理的病株率和防治效果。

　　病株率(%)=病苗數/調查總苗數×100;

　　防治效果(%)=(對照區病株率-處理區病株率)/對照區病株率×100。

　　2 結果與分析

　　2.1 種子帶菌率

　　在供試的66粒稻種中，長出惡苗病菌的種子52粒，帶菌率為78.79%。

　　2.2 惡苗病菌對氰烯菌酯的抗藥性

　　共分離得到51株惡苗病菌，其中氰烯菌酯高抗菌株49株，抗藥性頻率為96.08%，為優勢致病菌株; 另2株為氰烯菌酯中高抗菌株，頻率為3.92%; 本次樣品中未檢測到低抗和中抗菌株，也沒有檢測到敏感菌株。

　　2.3 藥劑篩選

　　不同藥劑處理對水稻惡苗病的防治效果存在顯著差異，25%氰烯菌酯懸浮劑對水稻惡苗病的防治效果最差，2 000倍液和750倍液處理的水稻秧苗病株率分別為62.01%和38.47%，防治效果僅37.44%和61.10%; 而25%咪鮮胺乳油2 000倍液、25%咪鮮胺乳油2 000倍液+25%氰烯菌酯懸浮劑2 000倍液混配、4.23%甲霜·種菌唑微乳劑400倍液和600倍液對水稻惡苗病的防治效果好，播種后18 d的防效均達到99.00%左右，這3種藥劑浸種處理間差異不顯著，均極顯著高于25%氰烯菌酯懸浮劑2 000倍液和750倍液處理。

　　農業論文投稿期刊：《浙江農業科學》系浙江省農業科學院和浙江大學聯合主辦的綜合性農業科技刊物，國內統一刊號：CN 33-1076/S，國際標準刊號：ISSN 0528-9017，創刊于1960年，是全國創辦較早的農業科技刊物之一。

　　3 小結與討論

　　從供試惡苗病株分離的惡苗病菌已經對氰烯菌酯產生了嚴重的抗藥性，而且供試稻種的帶菌率也非常高，是導致該地2019年早稻惡苗病大發生的主要原因。 因此，應該加強稻種帶菌以及惡苗病菌對主要浸種藥劑抗藥性的早期檢測與預警，科學選用藥劑，從而實現水稻惡苗病的有效防控。 本試驗表明，4.23%甲霜·種菌唑微乳劑400倍液和600倍液、25%咪鮮胺乳油

　　2 000倍液、5%咪鮮胺乳油2 000倍液+25%氰烯菌酯懸浮劑2000倍液混配液浸種48 h對惡苗病防效較好，顯著優于25%氰烯菌酯懸浮劑750倍液和2 000倍液浸種處理，適合在老(重)病區和對氰烯菌酯抗性較高的地區輪換使用來控制惡苗病的發生為害。

　　參考文獻：

　　[1] ZAINUDIN N, RAZAK A A, SALLEH B. Bakanae disease of rice in Malaysia and Indonesia: etiology of the causal agent based on morphological, physiological and pathogenicity characteristics [J]. J Plant Protect Res, 2008, 48(4): 475-485.

　　[2] 李海東，方利民，尤希宇，等. 3種藥劑浸種對水稻安全性及惡苗病的防治效果[J]. 浙江農業科學，2017，58(12)：2 235-2 238.

　　[3] 沈麗麗，陳翠芳，陳芳芳，等. 氰烯菌酯等藥劑防治水稻惡苗病試驗[J]. 浙江農業科學，2016，57(3)： 382-384.

　　[4] 葉挺云，謝子正，許渭根，等. 2016年浙江省早稻惡苗病發生特點及防控建議[J]. 浙江農業科學，2017，58(3)：449-450.

　　作者：王國迪1 陳瑞1* 汪彥欣1 趙麗1 張宇2