【摘要】目的研究黃精對運動小鼠增強免疫力和緩解體力疲勞作用。方法采用小鼠灌胃，進行黃精增強免疫力和緩解體力疲勞試驗。結(jié)果增強免疫力試驗中，中、高劑量組能提高小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(P<0.01)，高劑量組能提高小鼠血清溶血素試驗中抗體積數(shù)(P<0.05)，中、高劑量組能提高碳廓清能力和巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力(P<0.05);緩解體力疲勞功能試驗中高劑量組(1.5g/kg)能顯著延長小鼠的力竭游泳時間(P<0.05)，顯著增加肝糖原儲備(P<0.05);中(0.5g/kg·bw)、高劑量組(1.5g/kg·bw)能顯著降低小鼠血清尿素含量(P<0.05，P<0.01)，顯著減少血乳酸曲線下面積(P<0.05，P<0.01)。表明黃精具有緩解體力疲勞作用。結(jié)論黃精具有增強免疫力和緩解體力疲勞功能。

　　關鍵詞：黃精;體力疲勞;免疫

　　黃精(Polygonatumsibiricum)藥用歷史悠久，是常用的藥食同源植物。距今已有2000多年歷史，中醫(yī)古方黃精地黃丸、二精丸等至今仍在應用。《神農(nóng)本草經(jīng)》中記載:“黃精，味甘、平、無毒，主補中益氣，除風濕，安五臟，久服輕身，延年不饑”。現(xiàn)代研究表明，黃精中含有多糖、黃酮、低聚糖、生物堿、甾體皂苷、氨基酸等多種化學成分[1]，具有降血糖、抗氧化、增強免疫力、抗菌抗炎等多種藥理作用[2-5]。黃精也是保健食品原料，黃精作為藥食同源物品正被廣泛用于保健食品的開發(fā)中，截止目前，以黃精為主要原料申報的保健食品1000多種，申報的保健功能主要集中在增強免疫力、緩解體力疲勞、輔助降血糖等。隨著黃精經(jīng)濟價值和社會效益日漸突出，在保健食品領域有著巨大的開發(fā)潛力和廣闊的市場前景。

　　本試驗采用小鼠灌胃給藥，設三個劑量組和陰性對照組，進行了黃精的增強免疫力和緩解體力疲勞試驗，為開發(fā)具有增強免疫力和緩解體力疲勞功能的黃精類產(chǎn)品提供理論依據(jù)。

　　1儀器與材料

　　1.1動物SPF級昆明種小鼠，雄性，飼養(yǎng)環(huán)境為屏障級。

　　1.2受試物取一定量的藥材，10倍量水煎煮3次，每次2h，合并三次濾液濃縮成所需濃度。

　　1.3儀器與試劑動物天平、電子天平、鉛皮、電動玻璃勻漿器、低速離心機、分光光度計、游泳箱、恒溫水浴鍋、玻璃器皿、一次性定量取血管、試管、離心管、微量加樣器、手術器械。測定尿素、肝糖原和血乳酸的試劑盒均由南京建成生物公司提供。紫外分光光度計、酶聯(lián)免疫檢測儀、光學顯微鏡、血細胞計數(shù)器、24孔和96孔平底細胞培養(yǎng)板、96孔U型底細胞培養(yǎng)板。

　　1.4統(tǒng)計學處理采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計分析，計量資料以(x±s)表示。對所得數(shù)據(jù)進行完全隨機設計單因素方差分析(不符合應用條件時需進行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換)，進一步兩兩比較采用LSD-t法。Pdddddd<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

　　2方法

　　2.1增強免疫力試驗[6]免疫功能檢測實驗選取雄性小鼠200只，分為4個免疫大組，每免疫大組又分為水對照組、低、中、高劑量組，每組各10只。免疫一組用于遲發(fā)型變態(tài)反應(DTH)實驗、血清溶血素測定、抗體生成細胞數(shù)測定;免疫二組用于小鼠碳廓清實驗;免疫三組用于小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗;免疫四組用于小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗和小鼠NK細胞活性測定。實驗環(huán)境溫度22℃±2℃，相對濕度50%±10%。

　　高、中、低劑量組給藥劑量分別為生藥1.5g/kg、0.5g/kg、0.25g/kg(分別相當于人體推薦劑量的30、10和5倍)，對照組給予等體積純化水。各組灌胃給藥，每日1次，連續(xù)30d，灌胃體積均為0.1mL/10g體重。連續(xù)灌胃30d后測各項指標，包括細胞免疫功能指標、體液免疫功能指標、單核-巨噬細胞吞噬指標及NK細胞活性測定。

　　2.2緩解體力疲勞試驗選取檢疫合格小鼠160只，將小鼠隨機分為4大組，按體重隨機分為陰性對照組和高、中、低劑量組，每組10只小鼠。高、中、低劑量同增強免疫力試驗，經(jīng)口每日一次灌胃給予小鼠受試物，灌胃體積按20mL/kg.bw，陰性對照組以等體積的純化水代替受試物溶液灌胃，連續(xù)給予30d后測定緩解體力疲勞功能的各項指標。包括負重游泳時間、血清尿素、肝糖原、血乳酸。

　　3結(jié)果

　　3.1增強免疫力試驗

　　3.1.1對小鼠體重、臟器體重比值的影響

　　小鼠初始體重、灌胃30天后體重增長值均數(shù)在各組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。小鼠脾臟體重比值均數(shù)和胸腺體重比值均數(shù)在各組間比較，差異亦無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

　　3.1.2各劑量組小鼠細胞免疫功能指標比較

　　小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應結(jié)果顯示，中、高劑量組小鼠足跖腫脹度顯著高于對照組(P<0.01)，表明受試物可提高小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應能力。

　　ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗結(jié)果顯示，各組間的淋巴細胞增殖能力均數(shù)差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。表明受試物對小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化能力無影響。見表2。

　　3.1.3各劑量組小鼠體液免疫功能指標比較

　　小鼠抗體生成細胞數(shù)測定表明各組間抗體生成細胞數(shù)均數(shù)差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。小鼠血清溶血素實驗中，高劑量組與對照組間比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

　　3.1.4小鼠單核巨噬細胞吞噬功能影響采用小鼠單核-巨噬細胞碳廓清能力測定實驗和小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力測定實驗。前者中、高劑量組吞噬指數(shù)1與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);后者中、高劑量組吞噬指數(shù)2、吞噬率平方根反正弦轉(zhuǎn)換值與對照組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

　　3.1.5小鼠NK細胞活性改變各組間小鼠NK細胞活性差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。表明受試物對小鼠NK細胞活性無影響。

　　3.2抗疲勞試驗

　　3.2.1各組動物的體重在試驗前實驗中及結(jié)束時均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。表明對小鼠體重無不良影響。

　　3.2.2小鼠5%負重游泳試驗與陰性對照組比較，高劑量組小鼠負重游泳時間顯著性延長，有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

　　3.2.3小鼠力竭運動后血清中尿素/肝糖原測定試驗

　　中、高劑量組小鼠血清尿素含量顯著性低于對照組(P<0.05，P<0.01);高劑量組小鼠肝糖原含量顯著性高于對照組(P<0.05)。

　　3.2.4小鼠力竭運動后血乳酸的影響測定試驗

　　經(jīng)口給予小鼠不同劑量樣品后，游泳前、游泳后休息0min、休息20min時各組小鼠血乳酸含量均無顯著性差異(P>0.05)。中、高劑量組小鼠三個時間點血乳酸曲線下面積與對照組比有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)。

　　4討論

　　隨著社會節(jié)奏的加快，社會競爭日益激烈，免疫低下及疲勞已成為威脅人類健康的重要因素。因此具有增強免疫力及緩解體力疲勞的保健食品具有很好的市場前景。黃精作為藥食同源中藥之一，有悠久的食用歷史，在中國應用已有千年歷史，被道家譽為養(yǎng)生圣藥，常用來延年益壽，療諸病。本研究依據(jù)衛(wèi)生部《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》2003年版中緩解體力疲勞及增強免疫力試驗方法，選用小鼠進行試驗，研究了黃精的增強免疫力和緩解體力疲勞作用。

　　經(jīng)口灌胃給予小鼠0.25、0.5、1.5g/kg·bw劑量的黃精30d后，與對照組比較，中、高劑量組能提高小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應;高劑量組能提高小鼠血清溶血素實驗值抗體積數(shù);中、高劑量組能提高碳廓清能力和巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力(P<0.05);對小鼠體重增長、胸腺/體重比值、脾臟/體重比值無影響;對ConA誘導的小鼠脾淋巴細胞轉(zhuǎn)化、小鼠抗體生成、小鼠NK細胞活性均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》(2003年版)中增強免疫力功能的判斷標準，本實驗中細胞免疫功能和單核巨噬細胞功能結(jié)果均為陽性，表明黃精具有增強免疫力的功能。

　　經(jīng)過30d連續(xù)灌胃黃精，高劑量組(1.5g/kg)能顯著延長小鼠的力竭游泳時間(P<0.05)，顯著增加肝糖原儲備(P<0.05);中(0.5g/kg·bw)、高劑量組(1.5g/kg·bw)能顯著降低小鼠血清尿素含量(P<0.05，P<0.01)，顯著減少血乳酸曲線下面積(P<0.05，P<0.01)。表明黃精具有緩解體力疲勞作用。

　　參考文獻

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　　[2]楊勝坤.黃精多糖對糖尿病大鼠血糖水平的影響[J].中國實驗方劑學雜志，2011，17(16):297.

　　[3]方歡樂，李曉明，李秋全，等.黃精多糖的提取及抗氧化作用的研究[J].生物化工，2018，(03):11-12，15.

　　[4]顧曉龍，羅明友.黃精對小鼠免疫調(diào)節(jié)作用的影響研究[J].四川畜牧獸醫(yī)，2019，(04):24-26.

　　[5]鄭春艷，汪好芬，張庭廷.黃精多糖的抑菌和抗炎作用研究[J].安徽師范大學學報(自然科學版)，2010，33(03):272-275.

　　作者：張新日，李國良，宋一凡，張夢欣

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